Definire il ruolo di TFEB e valutare la sua modulazione farmacologica nel rimodellamento renale e nella progressione della malattia nella TSC

Questo progetto è stato finanziato grazie al Bando Seed Grant da Fondazione Telethon ETS.

Il complesso della sclerosi tuberosa (TSC) è una malattia genetica rara che può causare cisti e lesioni tumorali nel rene e rappresenta una causa importante di complicanze nei pazienti adulti. Le terapie disponibili non riescono sempre a prevenire la progressione della malattia renale e molti aspetti dei meccanismi che portano al rimodellamento del tessuto renale non sono ancora chiariti. Nel nostro lavoro preliminare abbiamo generato “mini-reni” umani (organoidi renali) con perdita del gene TSC2 e abbiamo osservato alterazioni simili alla patologia della TSC, tra cui formazione di cisti, aumento del segnale mTOR e forte attivazione di TFEB/TFE3, fattori che regolano vie di riciclo cellulare. Abbiamo inoltre osservato che gli organoidi TSC rilasciano segnali capaci di indurre la patologia in organoidi sani, suggerendo un ruolo della comunicazione tra cellule nel promuovere il rimodellamento nel rene. Questo progetto affronterà tre aspetti: 1) identificheremo le proteine e i segnali rilasciati dagli organoidi TSC che influenzano le cellule circostanti e favoriscono il rimodellamento renale, utilizzeremo approcci di proteomica per confrontare il proteoma totale degli organoidi con ciò che viene secreto nel mezzo di coltura e nelle vescicole extracellulari, e testeremo l’effetto di questi segnali con saggi di trasferimento e co-coltura; 2) verificheremo se l’attivazione di TFEB, specificamente nelle cellule tubulari di organoidi sani, è sufficiente a riprodurre caratteristiche di rimodellamento simili alla TSC e a generare segnali secreti analoghi; 3) valuteremo come eltrombopag, un inibitore dell’attività trascrizionale di TFEB, modula i programmi dipendenti da TFEB e i fenotipi di rimodellamento negli organoidi, definendo finestra di trattamento, durata dell’effetto e impatto sui diversi compartimenti cellulari. L’obiettivo finale sarà chiarire i meccanismi della progressione della malattia renale nella TSC e ottenere informazioni utili per future strategie terapeutiche.