Tra le miopatie primarie, la Distrofia Muscolare di Duchenne (DMD) è certamente la più importante per diffusione e per gravità. Essa è dovuta a mutazioni del gene della distrofina che determinano progressiva degenerazione muscolare. La DMD fu subito considerata per una sperimentazione di terapia genica, tuttavia questa si presentava particolarmente complicata per le grandi dimensioni del gene difficile da clonare nella maggior parte dei vettori virali disponibili. Negli ultimi anni abbiamo sperimentato una strategia, diversa dalla sostituzione genica, che consiste nella correzione del difetto genico a livello dell’RNA. Molte delle mutazioni nel gene della distrofina producono un mRNA non funzionante; prevenendo l’inclusione nell’mRNA maturo di specifici esoni mutati (exon skipping) è possible ripristinare un fenotipo parzialmente corretto con la produzione di distrofina più corta ma funzionale. Qualche anno fa’ avevamo dimostrato che questa strategia era molto efficace in vitro: RNA antisenso contro specifiche giunzioni di splicing erano in grado di indurre skipping esonico e di ripristinare la sintesi di distrofina in cellule derivate da pazienti DMD. Risultati più recenti nel topo distrofico hanno mostrato che virus AAV codificanti per RNA antisenso danno alti livelli di attività delle molecole terapeutiche nei muscoli malati dove viene ripristinata sia la sintesi di distrofina che la funzionalità muscolare (Denti et al., 2006 and b). L’uso di virus AAV ha permesso di ottenere un’efficiente trasduzione in tutti i distretti muscolari inclusi il cuore e il diaframma. Pertanto questa strategia si rivela assai promettente ai fini di una possibile terapia genica della DMD nell’uomo. In previsione di questo, lo scopo di questo progetto è da una parte la produzione e validazione dell’efficacia di molecole antisenso capaci di indurre efficiente exon skipping in una collezione di diverse mutazioni DMD e dall’altra l’ottimizzazione della trasduzione di muscoli con AAV.