Per curare l'emofilia A, malattia in cui manca il fattore VIII della coagulazione, un nuovo approccio è rappresentato dalla ricerca sulle cellule capaci di produrre FVIII. Abbiamo recentemente dimostrato che le cellule endoteliali dei sinusoidi epatici (LSEC) producono e secernono FVIII, anche se non sono le uniche. Abbiamo dimostrato che animali deficitari di FVIII possono esser curati somministrando midollo osseo sano, il che indica che le cellule del midollo osseo, di origine emopoietica, mesenchimale o anche endoteliale, possono produrre e secernere FVIII. Sulla base di questi risultati ottenuti nei topi proponiamo che LSEC, cellule da cordone ombelicale o cellule da midollo osseo di origine umana possano essere sorgenti adatte a produrre FVIII in una terapia cellulare sostitutiva per il terapia dell'emofilia A. Per incrementare la possibilità di terapie cellulari e genetiche per l'emofilia A e per identificare ulteriori cellule produttrici di FVIII, intendiamo esplorare se la sostituzione dell'endotelio e del midollo osseo in topi emofiliaci con cellule umane sane può curare gli animali. Proponiamo, quindi, di studiare queste cellule umane in un ceppo particolare di topi emofiliaci, che permettono l'attecchimento delle cellule umane. In studi precedenti abbiamo visto che cellule mononucleate e stromali isolate dal midollo osseo umano esprimono l'RNA di FVIII. Per vedere se queste cellule del midollo osseo o cellule del cordone ombelicale producono FVIII, intraprenderemo studi sia in vitro con colture cellulari che in vivo in animali emofiliaci. Trapianteremo cellule del midollo osseo o del cordone ombelicale umane in topi emofiliaci NOD/SCID irradiati subletalmente e ci aspettiamo di vedere che la ricostituzione con midollo osseo sano corregga il fenotipo emorragico in questi topi. Successivamente, se necessario, esploreremo la possibilità di migliorare la cura mediante manipolazioni genetiche con vettori lentivirali delle cellule per aumentare l'espressione di FVIII.